蛋白分离纯化方法有哪些
01电泳
76%结果提及
电泳是蛋白质分离纯化的一种常用方法。在高于或低于蛋白质等电点的溶液中,蛋白质带有电荷,可以在电场中向电场的正极或负极移动。电泳法根据支撑物的不同,可以分为薄膜电泳和凝胶电泳等。
02透析
66%结果提及
透析是一种蛋白质分离纯化的方法,它利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开。透析本质上是以浓度差为推动力的膜分离过程。在蛋白质溶液中,透析法可以将蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖等分开,从而达到纯化的目的。
03盐析法
52%结果提及
盐析法是一种常用的蛋白质分离纯化方法。它利用不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同,通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质,并能再度溶解而不变性。
04分子筛
46%结果提及
分子筛,又称凝胶过滤,是一种根据蛋白质分子大小进行分离的方法。在这种方法中,小分子蛋白质能够进入分子筛的孔内,滞留时间长,而大分子蛋白质则不能进入孔内,径直流出。这种方法被广泛应用于蛋白质的分离纯化过程中,常常与其他方法联合使用以提高分离效果。
05超滤
45%结果提及
"超滤"是一种蛋白质分离纯化的方法,它通过加压、抽滤、离心等多种方式,使水和其他小分子溶质透过超滤膜,而蛋白质截留在膜上,以达到浓缩和脱盐的目的。这种方法的本质是以静压力差为推动力的膜分离过程。
06有机溶剂沉淀法
42%结果提及
有机溶剂沉淀法是一种常用的蛋白质纯化方法。该方法利用中性有机溶剂如乙醇、丙酮等,它们与水的介电常数较低,能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低,进而从溶液中沉淀出来。
07等电点沉淀法
39%结果提及
等电点沉淀法是一种常用的蛋白质分离纯化方法。它利用不同蛋白质等电点的不同,将蛋白质从混合溶液中分开。在等电点附近,蛋白质的溶解度最小,易沉淀析出。
08凝胶层析
30%结果提及
凝胶层析是一种常用的蛋白质分离纯化方法。当不同分子大小的蛋白质流经凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子不能进入凝胶珠内部,只能随溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动并最先流出体外;比凝胶珠孔径小的分子能不同程度的自由进出凝胶珠的内外。
09吸附层析
28%结果提及
吸附层析是一种蛋白质分离纯化的方法,它利用待纯化的分子和杂质分子与吸附剂之间的吸附能力和解吸性质不同而达到分离目的。在吸附层析中,蛋白质混合物被加到吸附剂上,待纯化的蛋白质与吸附剂特异性结合,而其他蛋白质则不被结合,通过洗涤除去。被特异结合的蛋白质可以用含游离的相应配体溶液把它从柱上洗脱下来。
10凝胶过滤法
25%结果提及
凝胶过滤法,也称分子排阻层析或分子筛层析,是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadexged)和琼脂糖凝胶(agarosegel)。这种方法利用混合物中各组分分子大小的差异,大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出,小分子蛋白质进入孔内,因此不同大小的蛋白质得以分离。
11超速离心
22%结果提及
超速离心是一种常用的蛋白质分离纯化方法,它利用蛋白质溶液在强大离心场中逐渐沉降的原理进行蛋白质的分离。各种蛋白质沉降所需离心力场不同,因此可以通过超速离心法分离蛋白质并测定其分子量。
12密度梯度离心
19%结果提及
密度梯度离心是一种根据蛋白质颗粒的质量和密度来分离蛋白质的方法。在具有密度梯度的介质中进行离心时,质量和密度大的蛋白质比质量和密度小的蛋白质颗粒沉降得快,从而在离心管中各组分被分离成各自独立的区带。这种方法的优点是,它可以根据蛋白质的质量和密度进行有效分离,而且不会引起蛋白质的变性或失活。
13凝胶过滤层析
10%结果提及
凝胶过滤层析是一种根据蛋白质分子大小的不同进行分离的方法。这种方法中,蛋白质混合样品通过装有葡聚糖凝胶(Sephadex)的柱子。由于凝胶颗粒具有网状结构,不同类型凝胶的网孔大小不同,因此只有比凝胶网孔小的蛋白质才能进入网孔内,而大于网孔的分子则不能进入被排阻在凝胶颗粒之外。
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